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Gibco原裝膠原酶樣品采集操作步驟

發(fā)布時(shí)間: 2017-09-27  點(diǎn)擊次數(shù): 2481次
Gibco原裝膠原酶具有*的消化天然膠原和變性膠原的能力??蛇x擇性作用于變性和未變性膠原,使之降解,而一般蛋白酶僅作用于變性膠原。創(chuàng)口壞死組織即通過(guò)膠原纖維附著于基底,Gibco原裝膠原酶可使創(chuàng)口邊緣膠原纖維降解,具有較好的清創(chuàng)作用,繼而促使肉芽生長(zhǎng),上皮化,加快創(chuàng)口愈合。對(duì)正常血管和神經(jīng)組織無(wú)損傷作用。
 
Gibco原裝膠原酶樣品采集操作步驟
實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前,各試劑均應(yīng)平衡至室溫,試劑不能直接在37溶解;試劑或樣品配制時(shí),均需充分混勻,混勻時(shí)盡量避免起泡。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測(cè)樣品含量,如樣品濃度過(guò)高時(shí),應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋?zhuān)允瓜♂尯蟮臉悠贩显噭┖械臋z測(cè)范圍,計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。
1、加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100,注意不要有氣泡,加樣時(shí)將樣品加于酶標(biāo)板底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37溫育2小時(shí)。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
2、棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測(cè)溶液A工作液100,酶標(biāo)板加上覆膜,37溫育1小時(shí)。
3、棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400/每孔,甩干。
4、每孔加檢測(cè)溶液B工作液100,加上覆膜,37溫育1小時(shí)。
5、棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,方法同步驟3。
6、每孔加底物溶液90,酶標(biāo)板加上覆膜37避光顯色。
7、每孔加終止溶液50,終止反應(yīng),此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物 液的加入順序相同。
8、立即用Gibco原裝膠原酶在450nm波長(zhǎng)測(cè)量各孔的光密度。
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